Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針
簡(jiǎn)要描述:
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針染料由Leslie Loew和同事開(kāi)發(fā),是靈敏且穩(wěn)定的快速響應(yīng)探針,能檢測(cè)亞毫秒級(jí)的膜電位變化。Di-4-ANEPPS(MX4038)和Di-8-ANEPPS(MX4039)在各種組織、細(xì)胞和模型膜系統(tǒng)中表現(xiàn)出相當(dāng)一致的熒光強(qiáng)度變化率(10%熒光變化/100mV)
產(chǎn)品時(shí)間:2021-07-12
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針
溫馨提示:見(jiàn)我司懋康生物(MKBio)整理的膜電位熒光探針(Probes for Membrane Potential)產(chǎn)品專題。
搜索關(guān)鍵詞:
膜電位熒光探針,Di-4-ANEPPS,Di-8-ANEPPS,ANEP染料,Fast-response probe 快速響應(yīng)探針, CAS:90134-00-2;
訂購(gòu)信息:
產(chǎn)品名稱 | 產(chǎn)品編號(hào) | 規(guī)格 | 價(jià)格(元) |
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針 | MX4038-5MG | 5mg | 2290 |
產(chǎn)品描述:
ANEP (AminoNaphthylEthenylPyridinium)染料由Leslie Loew和同事開(kāi)發(fā),是靈敏且穩(wěn)定的快速響應(yīng)探針,能檢測(cè)亞毫秒級(jí)的膜電位變化。Di-4-ANEPPS(MX4038)和Di-8-ANEPPS(MX4039)在各種組織、細(xì)胞和模型膜系統(tǒng)中表現(xiàn)出相當(dāng)一致的熒光強(qiáng)度變化率(10%熒光變化/100mV)。ANEP染料的電子結(jié)構(gòu)發(fā)生變化,從而,它們的熒光光譜對(duì)周?chē)碾妶?chǎng)變化做出響應(yīng)。這些光學(xué)響應(yīng)足夠快來(lái)檢測(cè)興奮細(xì)胞(包括單個(gè)神經(jīng)元、心肌細(xì)胞和完整組織制備物)的瞬時(shí)電位變化。另外,ANEP染料的激發(fā)光譜呈現(xiàn)出電位依賴的遷移,從而使其能通過(guò)測(cè)定激發(fā)波長(zhǎng)下的熒光比來(lái)定量膜電位。ANEP染料結(jié)構(gòu)上的差異使其適用于各種特定應(yīng)用(見(jiàn)附錄I和II)。
電位敏感ANEP染料的特征:
① 兩性離子分子,在不同細(xì)胞和組織樣本中表現(xiàn)出穩(wěn)定的電位響應(yīng)。
② 結(jié)合到磷脂膜上的大激發(fā)和發(fā)射波長(zhǎng)約為465/635nm【但光譜特征與環(huán)境密切關(guān)聯(lián)】
③ 非熒光直至結(jié)合到膜上
④ 溶于乙醇、DMSO和DMF【Di-2-ANEPEQ(MX4040)是水溶性的ANEP染料】
⑤ 快速響應(yīng)探針,適用于檢測(cè)亞毫秒的膜電位變化
Di-4-ANEPPS是各種細(xì)胞和組織類(lèi)型中表現(xiàn)穩(wěn)定的電位探針。細(xì)胞膜電位的變化與染料激發(fā)熒光強(qiáng)度的變化相關(guān)。Di-4-ANEPPS能快速被細(xì)胞內(nèi)在化,因此,主要用于短期實(shí)驗(yàn)。我司(懋康生物)也提供Di-8-ANEPPS(MX4039),親脂性更好且能更好的保留在質(zhì)膜外層。
基本特性:
1) CAS NO:90134-00-2
2) 化學(xué)名:Pyridinium, 4-(2-(6-(dibutylamino)-2-naphthalenyl)ethenyl)-1-(3-sulfopropyl)-, hydroxide, inner salt
3) 分子式:C28H36N2O3S
4) 分子量:480.66 g/mol
5) 外觀:橙色至暗紅色固體
6) 純度:≥95%(HPLC)
7) 熒光:λex 496 nm, λem 705 nm in methanol【需注意:相較于在有機(jī)溶劑內(nèi),苯乙烯染料與脂質(zhì)結(jié)合后通常發(fā)生很大的藍(lán)光遷移】
8)溶解性:溶于DMSO、乙醇、DMF
1)熒光染料均存在淬滅問(wèn)題,請(qǐng)盡量注意避光,以減緩熒光淬滅。
2)為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 儲(chǔ)存液制備
將低溫保存的凍干粉置于室溫回溫至少20min,低速離心后,將其溶于有機(jī)溶劑比如乙醇、DMSO或DMF配制成1mg/ml(~2mM)的儲(chǔ)存液。將儲(chǔ)存液避光保存在+4℃。
2. ANEP染料的細(xì)胞加載
2.1 批量加載
爬片培養(yǎng)的貼壁細(xì)胞一般通過(guò)將少量的染料儲(chǔ)存液(比如溶于DMSO)加入細(xì)胞培養(yǎng)基(終濃度為0.2-2μM)進(jìn)行標(biāo)記即可。更高的染料濃度(10-50μM)用于標(biāo)記灌注的組織樣本。通常要加0.05% Pluronic® F-127(MS4301)在標(biāo)記溶液內(nèi),以提高染料的溶解(對(duì)于親脂性更高的ANEP染料比如Di-8-ANEPPS尤其不能省略)。低標(biāo)記溫度(4-20℃)能抑制染料的內(nèi)在化。含探針的溶液孵育10-20min,細(xì)胞用不含染料的培養(yǎng)基清洗3次。
2.2 逆行標(biāo)記
特定的神經(jīng)元群細(xì)胞可通過(guò)定位壓力注射高濃度的染料溶液(10-20mg/ml,溶于DMSO或乙醇)進(jìn)入神經(jīng)組織來(lái)實(shí)現(xiàn)標(biāo)記。
3. 熒光測(cè)定
一般通過(guò)記錄激發(fā)在450nm和510nm,發(fā)射在>570nm處的熒光強(qiáng)度來(lái)進(jìn)行熒光比率成像測(cè)定。當(dāng)膜超極化,熒光強(qiáng)度比率(F450/F510)降低。電位響應(yīng)的校準(zhǔn)可通過(guò)使用離子載體纈氨霉素(MS0049)和添加不同鉀離子濃度到細(xì)胞外培養(yǎng)基來(lái)調(diào)整多種膜電位來(lái)實(shí)現(xiàn)。
相關(guān)產(chǎn)品
貨號(hào) | 名稱 | 規(guī)格 |
MX4038-5MG | Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針 | 5mg |
MX4039-5MG | Di-8-ANEPPS 膜電位熒光探針 | 5mg |
MX4040-5MG | Di-2-ANEPEQ (JPW 1114) 膜電位熒光探針 | 5mg |
MS4301-1G | Pluronic® F-127, Cell Culture Tested 細(xì)胞培養(yǎng)級(jí) | 1g |
MS4302-1ML | Pluronic® F-127 (20% Solution in DMSO), Cell Culture Tested | 1ml |
MS4601A-100ML | Dimethyl Sulfoxide (DMSO), Cell Culture Tested 二甲基亞砜(細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)) | 100ml |
MS0049-10MG | Valinomycin 纈氨霉素 | 10mg |
——Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
上海懋康生物科技有限公司是一家涉足于生命科學(xué)和生物技術(shù)領(lǐng)域研究的試劑、儀器和實(shí)驗(yàn)室消耗品與實(shí)驗(yàn)服務(wù)工作,主要從事細(xì)胞生物學(xué)、植物學(xué)、分子生物學(xué)、免疫學(xué)、生物化學(xué)、蛋白組學(xué)。生物制藥與診斷試劑研發(fā)生產(chǎn)等領(lǐng)域。 本公司秉承“以人為本,以誠(chéng)為信、合同守信”的經(jīng)營(yíng)理念。堅(jiān)持"品質(zhì)保障"的原則為廣大客戶提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品。
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針
Di-4-ANEPPS 膜電位熒光探針